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¿Qué es un FITC anticuerpos?

A (FITC) de anticuerpo conjugado con isotiocianato de fluoresceína es un marcador molecular fluorescente altamente específico para una proteína en particular o un anticuerpo primario. Se utilizan para identificar las proteínas en ensayos de inmunocitoquímica, enzimas y actividad de la proteína, citometría de flujo, y Western Blot. La mayoría de los anticuerpos FITC se pueden comprar a través de empresas especializadas en biología molecular o fabricados por los laboratorios de investigación individuales.

FITC es un fluorocromo conjugado o a menudo unida a un anticuerpo con el fin de hacer un marcador específico, fluorescente. Cuando se expone a la energía electromagnética a una longitud de onda específica, fluorocromos son sustancias químicas que absorben la energía y emitir un fotón a una longitud de onda específica. FITC absorbe la energía a 495 nm y emite un fotón a 521 nm. Cada fluorocromo tiene un intervalo de absorción y emisión diferente, permitiendo la detección sistemática de muchos anticuerpos fluorocromo-vinculado en una pieza de tejido o muestra. Esto es similar a etiquetar diferentes partes de una célula con diferentes colores y luego usando vasos especializados para mirar a un solo color a la vez.

Los anticuerpos pueden estar vinculadas, o conjugados, a la molécula de FITC para producir un anticuerpo FITC. Este anticuerpo FITC se puede utilizar para etiquetar directa o indirectamente una proteína. Cuando un anticuerpo FITC etiquetas directamente una proteína, que actúa como el anticuerpo primario, o un anticuerpo en contacto directo con el antígeno. Uso indirecto de un anticuerpo FITC se produce cuando se utiliza como un anticuerpo secundario, que se une específicamente a un anticuerpo primario. Cuando un anticuerpo conjugado con FITC se utiliza directamente, el procedimiento de etiquetado toma menos tiempo, pero el etiquetado no es tan fuerte. El marcaje indirecto da un paso extra, pero la señal o la etiqueta se amplifica debido a que varios anticuerpos secundarios marcados con FITC se puede unir a un único anticuerpo primario.

Hay muchos usos para el anticuerpo FITC en biología celular y molecular. Este tipo de anticuerpo se puede usar solo o en combinación con otros anticuerpos monoclonales o policlonales para etiquetar proteínas específicas dentro de las células en una técnica conocida como inmunocitoquímica. Anticuerpos FITC también se pueden utilizar en técnicas tales como ensayos enzimáticos y actividad de la proteína, citometría de flujo, y Western Blot.

Anticuerpos primarios y secundarios conjugados con FITC están ampliamente disponibles a través de muchas compañías de biología molecular. También es posible que los laboratorios a preparar sus propios anticuerpos primarios y luego usar un kit para conjugar FITC a ellos. Algunas compañías tendrán anticuerpos primarios de laboratorio preparados y conjugarlos con el fluorocromo FITC para un laboratorio. Anticuerpos secundarios-FITC conjugado no se hacen típicamente por los laboratorios de investigación individuales, y por lo general se compran a empresas especializadas en la producción de anticuerpos secundarios.